[發明公布] 一種高特異性的細胞分泌蛋白富集方法的發明專利
摘要:
分泌蛋白組學的研究在疾病的早期診斷,以及疾病的治療方面都有著廣泛的應用。傳統分泌蛋白富集方法多采用無血清培養,但這一培養方式存在種種弊端。本發明提供了一種二步法肽段層面富集的蛋白富集流程,極大的提高了該方法的特異性。同時,本發明引入了一種可以替代甲硫氨酸的非自然氨基酸——疊氮基代丙氨酸(Azidohomoalanine,AHA)來對細胞自身合成的蛋白進行標記。再結合近年來廣泛應用的點擊化學反應,可以高效地將修飾了炔基的生物素(biotin)加到AHA的插入位點。借助生物素這一標記,便能夠實現對含血清的培養基中分泌蛋白的分離純化及鑒定。